Kontakta författare

Vad är papperskromatografi?

Papperskromatografi är en av de typer av kromatografiprocedurer som körs på ett specialiserat papper. Det är ett plant kromatografisystem där ett cellulosafilterpapper fungerar som en stationär fas på vilken separationen av föreningar sker.

Princip för papperskromatografi : Principen är partitionskromatografi där substanserna fördelas eller fördelas mellan vätskefaser. En fas är vattnet, som hålls i porerna i det använda filterpapperet; och andra är den mobila fasen som rör sig över papperet. Föreningarna i blandningen separeras på grund av skillnader i deras affinitet mot vatten (i stationär fas) och lösningsmedel för mobil fas under rörelsen av mobil fas under kapillärverkan av porer i papperet.

Principen kan också vara adsorptionskromatografi mellan fasta och flytande faser, varvid den stationära fasen är papperets fasta yta och vätskefasen är av mobilfasen. Men de flesta tillämpningar av papperskromatografi fungerar enligt principen om partitionskromatografi, dvs fördelat mellan vätskefaser.

Användningar och tillämpningar av papperskromatografi

Papperskromatografi används speciellt för separering av en blandning med polära och icke-polära föreningar.

För separering av aminosyror.

Det används för att bestämma organiska föreningar, biokemikalier i urin etc.

Inom läkemedelssektorn används det för bestämning av hormoner, läkemedel etc.

Ibland används det för utvärdering av oorganiska föreningar som salter och komplex.

Stigande papperskromatografi

Stigande typ

Radialpappkromatografi

Typer eller lägen för papperskromatografi

Baserat på hur utvecklingen av kromatogram på papper görs i procedurer har vi i stort sett fem typer av kromatografi.

1. Stigande kromatografi : Som namnet antyder stiger kromatogrammet. Här sker pappersutvecklingen på grund av lösningsmedelsrörelsen eller uppåtgående på papperet.

Lösningsmedelsbehållaren är i botten av bägaren. Pappersspetsen med provfläckar doppar bara i lösningsmedlet i botten så att fläckarna förblir långt över lösningsmedlet.

2. Fallande kromatografi : Här inträffar utvecklingen av papper på grund av att lösningsmedlet reser nedåt på papperet.

Lösningsmedelsbehållaren är överst. Lösningsmedlets rörelse stöds av tyngdkraft förutom kapillärverkan.

3. Stigande-fallande läge : Här reser lösningsmedel först uppåt och sedan nedåt på papperet.

4. Radialläge : Här rör sig lösningsmedlet från mitten (mittpunkten) mot periferin av cirkulärt kromatografipapper. Hela systemet förvaras i en täckt petriskål för utveckling av kromatogrammet.

Veken vid papperscentret doppar ner i mobilfasen i en petriskål, genom vilken lösningsmedlet dränerar vidare till papperet och rör sig provet radiellt för att bilda provfläckarna för olika föreningar som koncentriska ringar.

5. Två-dimensionell kromatografi: Här sker kromatogramutvecklingen i två riktningar i rät vinkel.

I detta läge spottas proverna i ett hörn av rektangulärt papper och tillåts för första utvecklingen. Sedan nedsänks papperet igen i mobilfasen i rätt vinkel mot den tidigare utvecklingen för det andra kromatogrammet.

Experiment Demo Video

Förfaringsmetod för papperskromatografi

Den experimentella metoden involverar:

a) Val av lämplig typ av utveckling : Detta beror på komplexiteten hos blandningen, lösningsmedel, papper etc. Men i allmänhet används stigande typ eller kromatografi av radiell typ eftersom de är enkla att utföra, hantera, mindre tidskrävande och också ge kromatogram snabbare.

b) Val av lämpligt filterpapper : Filterpapper väljs baserat på porstorlek, kvaliteten på provet som ska separeras och även utvecklingsläge.

c) Beredning av prov : Beredning av provet involverar upplösning av provet i ett lämpligt lösningsmedel som används vid framställning av mobil fas. Det använda lösningsmedlet ska vara inert med provet som analyseras.

d) Spotting av provet på papperet: Prover ska upptäckas i rätt position på papperet, helst med ett kapillärrör.

d) Utveckling av kromatogram : Provat fläckpapper utsätts för utveckling genom att nedsänka det i mobilfasen. Mobilfasen rör sig över provet på papperet under kapillärverkan av papper.

e) Torkning av papperet och detektion av föreningarna : När utvecklingen av kromatogram är över; papperet hålls försiktigt vid gränserna för att undvika att vidröra provfläckarna och torkas med en lufttorka. Ibland sprutas detekteringslösningen i det utvecklade papperet och torkas för att identifiera provets kromatogramfläckar.